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    葉綠素熒光成像技術(shù)應用——水稻脅迫響應分析

    發(fā)布時間: 2020-07-20  點擊次數(shù): 2457次

     

    水稻生長過程中,易遭受各種非生物脅迫(如干旱、鹽堿)與生物脅迫(稻瘟病、白葉枯病等),從而嚴重影響水稻生產(chǎn)。針對上述脅迫對水稻產(chǎn)生的影響進行可重復的表型分析是一項嚴峻挑戰(zhàn)。植物吸收的光能主要用以進行光化學反應、熱耗散及發(fā)出葉綠素熒光,三種途徑互為競爭,此消彼長。脅迫可能引起植物光反應系統(tǒng)中的捕光復合體結(jié)構(gòu)改變,光能的利用及分配變化,光合色素減少,相關(guān)代謝變化等,從而影響葉片的光學性質(zhì)。葉綠素熒光技術(shù)可直接、無損測量光量子效率等光合生理參數(shù)并獲取成像圖,作為反映植物光合生理狀態(tài)的重要量化指標,廣泛應用于水稻研究的方方面面。

    案例1:捷克科學院的David等,通過Fluorcam葉綠素熒光成像,對受稻瘟病、白葉枯病及干旱脅迫的不同水稻水稻品種進行了無損檢測。結(jié)果顯示,肉眼上沒有受脅迫變化的葉片,F(xiàn)v/Fm(大光量子效率)實際已經(jīng)降低,脅迫對植物的影響已經(jīng)產(chǎn)生,且隨著脅迫時間增加,F(xiàn)v/Fm降低的面積越大,尤其部分易感品種Fv/Fm降低明顯。表明葉綠素熒光成像及測量技術(shù)能靈敏檢測出植物遭受脅迫后的生理變化,并且為品種抗逆篩選提供量化指標。

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    A稻瘟病感染組   B白葉枯病感染組

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    稻瘟病感染組葉片F(xiàn)v/Fm

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    白葉枯病感染組葉片F(xiàn)v/Fm

    此外,研究中還使用了使用手持式儀器進行溫室、野外檢測。通過FluorPen手持式葉綠素熒光測量儀檢測樣本光合生理,分析脅迫影響下水稻ΦPSⅡ(PSⅡ光量子效率)、Ft(實時熒光)兩個葉綠素熒光參數(shù)的響應。通過PolyPen(原WinePen)手持式光譜測量儀,檢測脅迫導致的水稻反射光譜變化,獲取與稻瘟病、葉綠素、光合作用等有關(guān)的植被指數(shù),分析這些植被指數(shù)與水稻生理狀態(tài)變化的相關(guān)性。

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    案例2:意大利帕多瓦大學的Elide Formentin等從轉(zhuǎn)錄組和細胞生理分析的角度研究水稻鹽脅迫適應性和耐受性,其中針對耐鹽水稻Baldo和鹽敏感品種Vialone Nano的不同葉片進行Fluorcam葉綠素熒光成像分析。結(jié)果顯示,Vialone Nano的所有葉片的ΦPSⅡ在脅迫第二天即明顯降低,并隨著脅迫持續(xù)下降,說明其在鹽脅迫下光合效率不斷降低且未長出第4葉;Baldo的第1葉ΦPSⅡ在脅迫第6天發(fā)生明顯降低,而其他葉片*天均未發(fā)生顯著變化,新長出的第4葉光合狀態(tài)正常。

    成像結(jié)果圖還直觀顯示出葉片脅迫響應的同質(zhì)性。相比對照組,Vialone Nano脅迫組同一葉片的ΦPSⅡ,在第3天即呈現(xiàn)整葉均一、劇烈的下降,Baldo脅迫組葉片ΦPSⅡ變化則呈現(xiàn)非均一性,第6天起,才出現(xiàn)葉片個別部位ΦPSⅡ降低。

    研究中還發(fā)現(xiàn),在耐鹽品種Baldo鹽脅迫組的第2葉、第3葉的NPQ(非光化學熒光淬滅)顯著高于對照,且ΦPSⅡ保持在較高狀態(tài)的葉片區(qū)域其NPQ越高,而在Vialone Nano中則未出現(xiàn)這種趨勢。說明NPQ的升高與水稻應對脅迫的能力有關(guān)。

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    光合生理是水稻遺傳分析、表型研究中的重要環(huán)節(jié),光合狀態(tài)直接、靈敏地反應植物的生長狀態(tài)。易科泰作為葉綠素熒光技術(shù)機構(gòu)PSI的國內(nèi)*家代理服務中心,下設植物葉綠素技術(shù)與植物表型業(yè)務部,可提供全面的Fluorcam葉綠素熒光研究產(chǎn)品與方案。

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    參考文獻:

    2. Sebela, Quinones, V.cruz, et al. Chlorophyll Fluorescence and Reflectance-Based Non-Invasive Quantification of Blast, Bacterial Blight and Drought Stresses in Rice[J]. Plant & Cell Physiology, 2018.

    2. Elide F , Cristina S , Giorgio P , et al. Transcriptome and Cell Physiological Analyses in Different Rice C*rs Provide New Insights Into Adaptive and Salinity Stress Responses[J]. Frontiers in Plant Science, 2018, 9:204.

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